这里有多少发nature、science的？

pauliang

呵呵，多谢！

matthiasB

i am not specialized in ion channel or electrophisiology, but unfortunately i need to analyze some patch clamp results, which I can not  really understand.  For example, when 2 uM quinidine was applied to the hERG transfected HEK293 cells (whole cell model), the resting potential increased dramatically even without additional pulse activation?

i am at home and can not type in chinese..

pauliang

几个问题不明白：
1. Quinidine不是钾通道阻滞剂，其主要作用是阻断快Na通道，当然也可以阻断IKr，IKs等等。不是很明白为什么你们要给一个稳定转染HERG的细胞系用Quinidine？
2. 你们是做的Pacth，而且是全细胞模式记录的HEK293的电流，你是如何看到细胞的静息电位的？你是不是把Holding Potential和Resting Potential弄混了？

方便的话你可以把数据发给我，我抽空可以帮你分析一下（如果不是很多）。

matthiasB

I did not  do the experiment. I do not really know what they did. They are physicist......But  i am sure what i meant was resting potential instead of holding potential coz they fixed the current and measure the voltage.............Qunidine is also a hERG blocker. We used it here just as positive control.

matthiasB

我还是用input打中文吧。我作的不是常规的那个tail current recording.我们就是纯粹的测一个跨模电压。所以没有任何外加的电压pulse.我不能理解的是，既然连没外加电压那离子门就没inactivation or activation.但是尽管如此为杀那个resting potential 电压还会变呢

matthiasB

我们家当家的foxtail ta 老公发过nature de.haha

pauliang

Patch可以分两种：一种是钳住电压记录电流，一种是钳住电流记电压的变化。你们的就是后一种。就是说看在不同的电流下的电压大小。
因为当你给了一个电流时，细胞膜的电压就会有相应的变化的。
不知道这样说你明白了吗？
不过我还是不理解，为什么要用奎尼丁去阻断Iks。因为它毕竟不是特异性的钾通道阻断剂。

pauliang

http://en.wikipedia.org/wiki/Electrophysiology
希望这个链接能够帮到你，看完以后要是还有不明白的可以发消息给我。

matthiasB

quinidin我随口说的。。任何blocker都一样.只要是applied to the hERG transfected HEK293 resting potential都上升applied to the wild type HEK293 resting potential 都保持不变...........wei sha

pauliang

你是说静息电位从比如-80上升到-60？这个我认为很好解释啊，因为你把钾通道阻滞了，所以在表达HERG的293细胞上静息电位会上升。而Wild type（如果这里wild type你是指没有转染的293细胞的话）的293细胞表面是几乎没有钾离子通道表达的，所以静息电位也就几乎不变。